深挖猪流行性腹泻的过去及现在

猪流行性腹泻(porcineepidemicdiarrhea,PED)是由猪流行性腹泻病毒(porcineepidemicdiarrheavirus,PEDV)引起的猪的一种急性、高度传播性的肠道疾病。该病以急性肠炎、呕吐、水样腹泻和脱水为主要特征。各年龄猪均易感,尤其是哺育仔猪,发病率为%,死亡率为80%-%。现将PED在世界范围内的发病史进行综述,以期对认识我国当前流行的PED提供参考。

1欧美流行情况

PED于年在英格兰的架子猪和育肥猪中首次爆发(Oldham,);其临床表现除4-5周龄以下哺育仔猪不发病外,其它都与猪传染性胃肠炎(Transmissiblegastroenteritis,TGE)相似。不引4-5周龄以下哺育仔猪发病是当时PED与猪传染性胃肠炎病毒(Transmissiblegastroenteritisvirus,TGEV)和其他已知的肠道致病性病原所引起的疾病的不同之处。随后,本病蔓延至欧洲其他国家,被称为“1型流行性病毒性腹泻(Epidemicviraldiarrhea,EVD)”。

年在英格兰的猪群中又发现了急性病毒性腹泻,所有日龄的猪均感染发病(Wood,);同样排除了TGEV和其他已知的肠道致病性病原。为了与70年代初期所报道的1型EVD相区别,此病被称为“2型EVD”。1型腹泻和2型腹泻之间的区别在于2型腹泻能够侵害哺育仔猪。通过对不同日龄的实验猪口服自然感染发病猪的小肠或其内容物,能够复制出2型EVD;通过电镜,能够在感染猪的粪便和小肠上皮细胞中观察到类似未知冠状病毒的病毒样粒子(Chaseyetal.,)。

年比利时的4个猪场发生急性腹泻,所有年龄的猪均表现出水样腹泻。发病母猪腹泻3-4天后康复。7日龄以内仔猪的死亡率为50%;随着日龄的增长,死亡率降低。对发病猪小肠冰冻切片,用直接免疫荧光检测TGEV,结果TGEV阴性;在腹泻发生后6到12周的母猪的血清中没有检测到TGEV抗体,证实该次腹泻与TGEV无关。利用电镜对4个猪场的发病猪的粪便和小肠内容物进行检测,结果表明所有样品均能检测到冠状病毒样粒子;而且都检测不到轮状病毒粒子。其中1份含冠状病毒样粒子的粪便样品被命名为CV;利用原代猪肾细胞对该病毒进行培养,盲传4周后依然观察不到细胞病变;同时,排除了猪血凝性脊髓(Pensaertetal.,)。CV分离物进行接种试验,结果表明它能够引起哺乳仔猪和育肥猪发病,揭示了它的肠致病性特征(DeBoucketal.,)。由于,1型、2型腹泻的爆发与该冠状病毒有关,故统称为猪流行性腹泻(porcineepidemicdiarrhea,PED),并沿用至今。目前,1型和2型腹泻之间的临床差异的机制仍不清楚。

在比利时,年9月对10组不同来源的架子猪进行PEDV抗体研究,结果表明所有猪只未出现血清阳转;而年2月引入的其他7组架子猪出现腹泻,并于4周后出现血清阳性(VanReethetal.,)。在育肥猪场进行的血清学研究表明:年50%的猪场呈PEDV阳性,而年则无PEDV阳性猪场;这说这几年来PEDV感染在比利时明显减少(Pensaertetal.,)。

在荷兰,利用酶联免疫吸附方法(ELISA)对爆发急性PED的母猪和育肥猪进行了临床和病毒学研究。在腹泻发作开始时,没有发现血清阳性猪。最先表现出临床症状是育肥猪,然后是怀孕母猪、产子母猪及其仔猪、后备母猪和独立饲养的断奶仔猪。育肥猪和怀孕母猪的腹泻最严重;而哺育仔猪和青年断奶猪却很轻微或无腹泻症状。在首次发病后至少一年半内,该病在6到10周龄的猪只和新引进的后备母猪中呈地方性流行并持续存在(Pijpersetal.,)。

在捷克共和国,两个猪场发生了流行性腹泻,利用电镜和免疫电镜对小肠内容物进行了检测,证实腹泻由PEDV引起。对份21日龄以下腹泻猪的粪便样品进行检测,发现27份是PEDV阳性;同时,还检测出其他肠道病毒(Rodáketal.,)。

在西班牙,PED引起15个猪场中的7个猪场发生流行性水样腹泻,其中一个猪场的少数母猪发生持续性腹泻(Carvajaletal.,a)。-年血清学调查表明头母猪中有头存在PEDV特异性抗体;个猪场中有55.0%的猪场存在血清阳性猪(Carvajaletal.,b)。

在匈牙利,年对来自19个猪场的92份断奶仔猪的腹泻样品进行检测,其中5.5%的样品是PEDV阳性;PED被认为是引起断奶仔猪腹泻的主要疾病(Nagyetal.,)。

在意大利,年5月到年6月,所有日龄的猪均发生了流行性腹泻。利用电镜(electronmicroscopy,EM)、免疫电镜(immunoelectronmicroscopy,IEM)、聚合酶链反应(polymerasechainreaction,PCR)和血清学方法证实63个猪群的腹泻是由PEDV引起的。无黏液和血的水样腹泻通常和饲料消耗减少有关。在产仔到断奶猪群中,腹泻影响母猪和哺育仔猪,新生仔猪的死亡率为34%;在保育猪和育肥猪中,发病率为20%~80%,但是没有死亡或死亡率很低。根据猪群规模和饲养类型不同,该病持续数周或数月(Martellietal.,)。

在俄罗斯,年1月到年7月从9个不同地区的17个猪场的83头腹泻猪采集了份样品;经多重套式RT-PCR检测后,发现21份感染是由PEDV引起的,证实PED在俄罗斯猪群中流行(BenSalem,etal.,)。

年4月起美国暴发大规模的PED疫情,导致多万头仔猪死亡。

2亚洲流行情况

在亚洲PED的流行情况与欧洲不同,主要是高死亡率的急性腹泻。PED的爆发是急性的严重的,而且临床上无法与经典的急性TGEV爆发相区别,给亚洲的养猪业造成了很大的经济损失。

日本于年首次证实猪急性腹泻是由PED引起(Takahashietal.,)。年9月到年6月期间的爆发导致头猪死亡,哺育仔猪的死亡率为30%~%;在疾病流行期间,成年母猪表现一过性症状并伴有因素和产奶下降现象(Sueyoshietal.,)。年冬天,个猪场发生了PED,腹泻导致了头哺育仔猪中的头死亡(PensaertandYeo,)。

韩国于年首次证实PED能引起所有日龄的猪发生腹泻。年1月到年12月,兽医研究所诊断的71份病毒性腹泻病料中有56.3%被确诊为PED。90%的腹泻和10日龄以内仔猪有关。年对7个省的份血清进行了血清学调查,发现17.6%-79%的血清呈PEDV阳性(平均45%),表明PEDV已在一些地区呈地方流行性(PensaertandYeo,)。年8月到年7月,5个省的份腹泻病料中有50.4%被确诊为PED(Chaeetal.,)。

泰国于年首次报道了PEDV的发生。从那时起,对PEDV进行进一步的全面研究很少。从年末到年,PEDV在泰国的许多商品化猪场中流行,引起非常严重的损失。哺育仔猪表现为严重腹泻、脱水和呕吐物伴有奶瓣。许多发病猪场报道该病首先在产房发生,发病初期新生仔猪的发病率高达95%,死亡率为%。所有年龄的猪均感染,腹泻和食欲不振的程度因年龄而异。公猪和母猪表现为温和腹泻和厌食,并在一周内康复(Puranavejaetal.,;Olanratmaneeetal.,)。

越南于年初爆发流行性腹泻,给越南南部省份的养猪企业造成了很大的经济损失,通过病理学特征和RT-PCR证实是PED。调查表明急性腹泻症状发生于所有日龄的猪,感染猪发生急性水样腹泻,大部分成年猪能够康复。哺乳仔猪表现为严重水样腹泻、脱水和几日内死亡。哺育仔猪的发病率为%,死亡率为65%-91%(Duyetal.,)。年4月份日本报道了由PEDV引起的大规模腹泻疫情。

3国内流行情况

年在我国上海地区的猪场中发生了猪传染性腹泻。疫病流行于11月至次年的4月,具有明显的季节性。临床症状与猪传染性胃肠炎相似,所有年龄的猪均发生剧烈的腹泻,粪便如稀水,乳猪有呕吐症状。成年猪一般不死亡,乳猪的死亡率在50%以上。通过猪体传代,分离到5株猪体传代毒(黄均建等,)。

年吉林省三个猪场发生了疑似TGE的腹泻。三个猪场的腹泻都发生于春节前后的寒冷季节,传播迅速,流行期短,不分年龄大小均发病,发病率为73.6%~96%。仔猪的死亡率很高,可达%,但成年猪无死亡,病死率随年龄增长而降低。仔猪发病后精神不振,食欲减退,呕吐物含凝乳块。排黄色、灰色或黄绿色水样粪便,挤压腹部时立即喷出水样稀粪。多数仔猪发病后2~4天死亡。成猪发病后,食欲减退,精神稍差,排稀粪,泌乳量减少,5~7天后可自然恢复。通过仔猪人工感染传代试验,分离到2株猪体传代毒(李佑民等,)。由于PED与TGE临床症状相似,而且二者都是由冠状病毒引起的,从形态学上仍无法将它们加以区别。当时发病猪的小肠经电镜观察,只见到冠状病毒颗粒,就将其确诊为“猪传染性胃肠炎病毒”,而且用小肠粘膜涂片直接荧光抗体染色法证实上海、福建、辽宁、吉林四个省份的TGE肠传代毒之间具有共同的抗原性;并用免疫荧光交叉试验进一步探讨国内四个地方分离株与Miller毒株之间的抗原性关系,结果表明四个TGE毒株和Miller毒株之间的抗原关系不一致(高德荣等,;)。

~年,为了进一步确定引起我国猪只腹泻的病原,研究人员先后引进了TGEMiller株(美国)、SH株和TO株(日本)以及PEDV抗血清(CLV抗血清),利用荧光抗体染色试验、酶标记抗体交互染色试验、血清中和试验、猪体交互免疫试验和免疫电镜观察等方法证实PED在我国地方猪群中流行(黄均建等,;朱维正等,;钱永清等,;李佑民等,;宣化等,)。崔现兰等用免疫荧光法对来自黑龙江省、上海市、天津市、浙江省和广东省5个省市爆发腹泻的9个猪场的23份腹泻病料进行了检测,结果表明PED的阳性率为47.8%(崔现兰等,)。程庆华等对青海省的PED进行了研究,根据流行病学调查、病原学诊断和高免血清能保护仔猪等结果证实PED在青海省的猪群中流行(程庆华等,)。

自年起,对我国PEDV地方流行毒株进行分子流行病学调查中发现PEDV在免疫猪群中流行。M基因的遗传衍化分析表明:我国的地方流行毒株与欧洲毒株、韩国和日本毒株亲缘关系较远(Chenetal.,)。

年陈建飞等使用胶体金试纸条、RT-PCR、强,弱毒鉴别诊断方法结合基因序列测定等对来自11个省市的28猪场的份样品(粪便或小肠内容物)进行了检测。结果表明,猪流行性腹泻病毒(PEDV)的阳性率为54.7%(76/),猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)的阳性率为38.1%(53/),二者的混合感染率为25.9%,猪轮状病毒(PoRV)的阳性率为5.04%(7/),而猪kobuvirus的阳性率只有1.44%(2/)。综合仔猪的临床发病症状(呕吐、腹泻和脱水)和病料的检测结果等方面,认为该次腹泻病的主要病原为PEDV。

刘孝珍等对年的17株地方流行毒株的S1基因进行序列测定分析表明在我国猪群中有新基因型的毒株在流行。

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